內酰胺酶檢測方法主要包括這些,快來看看
更新時間:2024-03-15 文章更新于2024-03-15 點擊次數(shù):1496次
β-內酰胺酶是金黃色葡萄球菌和淋球菌等多種細菌產生的一種抗生素滅活酶,能裂解青霉素和頭孢菌素等β-內酰胺類抗生素的β-內酰胺環(huán),使其變成無抗菌活性的物質,從而表現(xiàn)為產酶細菌對這類抗生素耐藥。由于β-內酰胺酶檢測速度快,所以檢測β-內酰胺酶與常規(guī)藥敏實驗相比,能更快地獲得結果。檢測β-內酰胺酶的方法有酸度法和碘測定法。
內酰胺酶檢測方法主要包括以下幾種:
1.紙片擴散法:將含有β-內酰胺類抗生素的紙片放置在含有細菌的瓊脂平板上,通過觀察紙片周圍的溶解區(qū)域大小和形狀,判斷細菌是否產生內酰胺酶。
2.酶活性測定法:通過檢測含有β-內酰胺類抗生素的溶液中的內酰胺酶活性,判斷細菌是否產生內酰胺酶。
3.分子生物學檢測法:通過PCR技術擴增內酰胺酶基因,檢測細菌是否攜帶內酰胺酶基因。
在臨床應用中,紙片擴散法是常用的方法,因為其操作簡單、成本低、結果明顯易讀。但是,該方法存在著假陰性和假陽性的問題,需要結合臨床表現(xiàn)和病原學實驗結果進行綜合分析。
酸測量法:青霉素被β-內酶胺酶水解后成青霉素酸,pH值下降到6.8以下,用酚紅指示劑,由紅(紫)色(原液:枸櫞酸緩沖液pH8.5)→黃色(pH6.8以下);淀粉-碘測定法:β內酰胺酶破壞β內酰胺環(huán),碘與被打開β內酰胺環(huán)結合,使藍色的淀粉-碘復合物轉變成無色。β-內酰胺酶是多種不同類型以β-內酰胺類抗菌藥物為底物的降解酶,通過水解β-內酰胺環(huán)造成β-內酰胺類藥物失去活性,將待測菌與頭孢硝噻吩作用一定時間后,如待測菌產生青霉素酶,則可水解頭孢硝噻吩的β-內酰胺環(huán),顏色由黃色變?yōu)榧t色。
總的來說,內酰胺酶檢測對于臨床合理用藥和預防細菌耐藥性的發(fā)生具有重要意義。臨床醫(yī)生需要根據(jù)檢測結果,結合患者的病情和藥物使用史,選擇合適的抗生素治療方案,減少藥物的濫用和耐藥性的發(fā)生。
上一篇 : 菌落計數(shù)儀常見故障排查及預防方法分享 下一篇 : 菌落計數(shù)方法在各個領域得到廣泛應用